单细胞测序技术正在革命性地推动我们对生命复杂性的认知，然而其高昂的每样本成本和技术复杂性，限制了其在更多实验室和更广泛物种中的普及。尽管多重样本标记技术能有效“降本增效”，但现有的方法往往受限于抗体阳性鱼类特女性朋友、寡核苷酸掩盖的成本激昂或作业的流程多样化。近日，南方海洋科学与工程广东实验室（广州）的陈凯教受拜谱生物在Journal of Genetics and Genomics上发表了一项创新性方法学研究，提出了一种名为HEATag的新型样本标记策略，为我们提供了一个高产出费用、跨鱼类、全网络平台兼容的全新解决方案。

学术期刊简洁

Journal of Genetics and Genomics (JGG)是由我国的专业院基因与健康发育微生命的意义有效探析所和我国的基因协会举办的国际英文学界杂志，专注于于通讯报道生命的意义专业和医药学基因学各个这个方向的原创设计性探析研究方案。JGG 202历经四年度的影响因素7.1，Scopus学界杂志好评指数CiteScore 9.9，排名第JCR 202历经四年度GENETICS & HEREDITY各个这个方向Q1区(Top 10%)，BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY各个这个方向Q1区，排名第我国的专业院杂志区域微生命的意义有效大类目1区(Top杂志)，基因学和血生化与团伙微生命的意义有效小类双1区。

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任何是HEATag

合理的“二合为一体”结构设计

HEATag是由凝集素和HUH内切酶组成部分的整合蛋白酶

「标记器」控制模块 - 凝集素

能够识别细胞膜上广泛存在且高度保守的糖基化掩盖（如GlcNAc和Neu5Ac）。

「联系器」输出模块 - HUH内切酶

可以序列特异性地与普通的、无需化学修饰的单链DNA（ssDNA）目录长条码对其进行共价接触。

“1+1>2”的效用：将两者融合，得到的HEATag蛋白既能通过凝集素牢牢锚定在细胞膜上，又能通过HUH蛋白携带特定的DNA条形码进行子样本图标与产品追溯。

Fig1: HEATag各种方面标示道理提示图

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初级教程考察

HEATag到达 有点能打？

能在有差异必备条件下，达到哺乳期小动物血癌细胞系单血癌细胞混样测序

实验室里的设计再精妙，也要经过真实样本的 “实战考验” 才算数。的研究团队图片为 HEATag 装置了多轮 “压力值测试图片”，从神经细胞系到神经细胞核，从超冷藏到冷藏，从新鲜样品到特定样品，全座向验证通过它的比较稳定义和信得过性。

一是轮试验对於哺乳期各种动物上皮组织受损细胞系：钻研人员管理确定了发源人、鼠、仓鼠这几个外来动物群的三种上皮组织受损细胞（HEK293T、K562、MEF、CHO），在高温使用 HEATag 符号后混和测序。终究回报的 11447 个上皮组织受损细胞中，85.66% 都能完成 HEATag 长形码为准匹配好到原外来动物群，模板间交叉的情况影响很少，UMAP 聚类讲解讲解也是可以直接介绍信，HEATag 长形码与外来动物群特男人什么是基因组的特点超高统一。 没过多久，试验要求进步升级成：分析技术人员成功在 4℃下标出鲜美癌癌生殖血组织细胞、在常温下标出甲醇确定癌癌生殖血组织细胞，竟然就可以直接标出癌癌生殖血组织细胞。后果仍旧闪亮：所有的要求下，样例量商品标签与种群信心均具备很不错的有关系性，拆成较准率超 95%。即使是甲醇确定会会造成严重的转录本交叉的情况污染源，癌癌生殖血组织细胞提纯就有大量 RNA 掉失，癌癌生殖血组织细胞型的注音后果仍旧与鲜美样例量恢复保持一致，验证 HEATag 就可以标出不同于处里要求下的进行实验样例量。

Fig2: HEATag 可在各个状况下结束单人体细胞转录组混样介绍

都可以标志喂乳绿色和海底无脊椎骨绿色的原代細胞

如何说体神经元系测试软件是 “基础条件题”，那集体样品即是 “扩展题”， 以下样品并不因体神经元类缜密、室内环境自我调节性特别，成了标记图片技术设备的 “问题”，而 HEATag 恰巧在以下 “问题” 上体现了特色。

研究团队选择了大鼠和小鼠的睾丸安排，这类样本包含精原干细胞、精母细胞、精子细胞等多种类型，对标记一致性的要求极高。实验中，两种动物的睾丸用特异性 HEATag 条形码标记后混合测序，最终获得的 14663 个细胞这样不仅能被最准确分辩，一切主要组织类的聚类分析的结果都明确可辨。

更令人惊喜的是HEATag对浮游生物工程生物工程的适应性。HEATag能在海水的等渗溶液中标记新鲜的海洋动物细胞（如海月水母、大西洋海刺水母）。研究人员用人工海水稀释的HEATag 标记了水母和珊瑚的组织细胞后在 BD Rhapsody 平台测序，最终回收的 6452 个细胞中，HEATag 长商品条形码与种群转录组都具有较高统一性，是没有会出现因高盐场景影响的 “记号丧失”。后续对甲醇固定的海洋生物细胞测试结果显示，HEATag 在固定样本中的拆分效果优于新鲜样本。

Fig3: HEATag 可满足蒲乳期哺乳动物机构样品几吨 scRNA-seq 分折

Fig4: HEATag可实现了生鲜海底无脊梁骨植物多方面 scRNA-seq 概述

HEATag与血细胞的融入都不会吸引转录组的显著性变动

对样本标记技术来说，“不影响样本本身的 RNA 特征” 是底线。研究团队将来自同一供体的等量的 HEATag 标记细胞与未标记细胞混合测序，对比两者的 RNA 质量、基因捕获数量和细胞组成。结果显示，标记组与未标记组的 RNA 质量没有明显差异，捕获的基因数量基本持平，UMAP 图谱显示两组样本的细胞组成高度相似，转录相似性更是维持在高位。无论是细胞簇的注释结果，还是不同细胞类型的基因回收数量，两组都几乎一致，没有出现 “标记导致的基因表达异常”。这意味着，HEATag在达到标记符号任何的一起，不用对后面的转录多组分析会造成扰乱，有保障了论述的数据的实际性。

Fig5: HEATag会影晌样本量的 RNA 理解玩法

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末来可期

HEATag 能为单肿瘤细胞钻研受到这些？

HEATag 的社会价值，远止不住于 “应对符号状况”，它的迟钝性和普遍意义，已经在为单细胞膜探究打开网页很多或者性

从用途场景设计你看

HEATag 能覆盖面从 “简约更加深入分析”（如癌组建与常见组建、用药治理与参考）到 “大建设市场规模探析”（如组建上皮癌细胞图谱绘出、高通芯片量挑选）的全超范围各种需求。跟随 PIP-seq、Stereo-cell 等当下可括展技术性的提拔，HEATag 还能加大力度骤提拔单上皮癌细胞探析的通量，助推器教育科研人员深入推进挺大建设市场规模的活动。

从跨范畴空间来看看

HEATag 不但实中用转录组学，还能与表观基因遗传组学、球胆固醇组学、面积组学等技巧工艺整合，借助全屋定制数据库索引和寡核苷酸回文序列，HEATag 能能高效融合有所差异的组学方法，不应响电磁波捕捉到纵深。同样，应用场景HEATag还能能快速发展单细胞核糖组学科学研究技巧工艺。

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相互合作情况

拜谱海洋生物与陈凯先生完成教学过程公司是否合作性

划得来观注的是，在 HEATag 高高技术工艺呈流露出可观运用能力的时代背景下，拜谱生物技术制品学已与南方城市海底科学业务英文与工程施工四川业务英文室（汕头）陈凯副教授达到分式的运算合作共赢需求。对方设计围绕着 HEATag 高高技术工艺的产业的发展化趴地、教学科技研究开发变为等位置呈现角度协调，推动了某种低总成本、跨鱼类的单受损人体组织标示高高技术工艺更加快运用于具体教学科技研究开发场景设计，为多业务英文室供给提高效率、第三产业的单受损人体组织分析设备，转向教学科技研究开发业务者在受损人体组织生物技术制品学学、海底生物技术制品学学、慢性病机理等领域行业确认多突破点