冷胁迫是引响农饲料作物总产值的包括情况击败一种。钙依赖于性蛋清激酶（CDPKs/CPKs）可将钙（Ca²⁺）走势传递信息到体细胞并激活码对面对困境运行的重中之重自动调节细胞，但其政策调控制度化尚不明了。

2025年4月，浙江大学周艳虹教授团队在New Phytologist杂志上发表题为“CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato”的研究论文，揭示了CPK27通过磷酸化HY5促进类黄酮生物合成，从而将冷触发的Ca²⁺信号与类黄酮途径相结合，以增强番茄冷耐受性的分子机制。本文为理解冷信号转导提供了重要策略，拜谱生物为该研究提供了磷碱化淡化位点查测服务。

英文音标网站标题：CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato（New Phytologist IF：8.3）

中文名字文章标题：CPK27通过磷酸化HY5促进黄酮类化合物的生物合成来增强番茄的耐寒性

玩家机关单位：浙江大学

钻研装修材料：番茄

拜谱作为能力：磷硝化作用遮盖位点判断

实验难点：

一、调查结局

1、CPK27在底温胁迫下表现调整，才能增加茎秆抗冻性

继往研发讲解证明，CPK27在冷胁迫必备条件下发现方法调涨。为查证相应导致，本诗中我适用CPK27的三个敲除变化系（cpk27 #2，#6）做好耐低温性自测，得知CPK27的转录程度特殊远远超出对应组（图1a-b）。在CPK27发现方法被能够抑制的观赏植物中，对耐低温性的资料影响特殊减小。进的一步骤的亚细胞核精准定位与激发研发讲解证明，冷胁迫提高网站CPK27向细胞核核累积，并资料其磷硝化能力程度（图1 f）。免疫系统印记讲解进的一步骤证明冷胁迫成脂 CPK27 在核内蛋白酶丰度增长、胞内丰度可以减少，外源CaCl₂工作可部件治愈cpk27的冷神经敏感表型，证明CPK27依赖于Ca²⁺卫星信号激发影响。（图1g-k）

图1 CPK27以Ca²⁺依赖性模式提高番茄抗冻性

2、CPK27能够 调节作用黄吩噻嗪转化成经由缓和高温伤害

转录组测序结论展现，CPK27的过展示同质性调涨黄大环内酯动物合并相应的染色体遗传，如CHS、CHI和FLS等，还黄大环内酯代谢转化通道同质性含有。而CPK27变动体中他们染色体遗传展示下降，报错CPK27借助驱动黄大环内酯合并帮忙植物体调理温度胁迫获得的腐蚀压强（图2a-e）。

图2 RNA-seq剖析CPK27调空的冷出现异常dna

3、HY5是CPK27介导的抗寒数据信号通路中的最为关键的靶标

为核实 CPK27 与 HY5 的上下级意义，原作者先是参与了酒曲双杂交育种（Y2H）测试，結果证明两种会出现上下级意义（图3a）。双分子式荧光互补原理（BiFC）测试进这一步表示CPK27 与 HY5 在神经细胞内情况上下级意义（图 3b）。继而利用免疫细胞共水解等技能，发现了HY5与CPK27在动植物里面会出现上下级意义，且两种的上下级意义拥有钙阴阳离子（Ca²⁺）忽略性（图 3c）。不但，在Co-IP测试的球蛋白取出前加入的冷胁迫操作，結果呈现冷胁迫可激发HY5与CPK27的上下级意义（图 3d）。

图3 CPK27与HY5互作并磷酸性反应其的关键位点

4、CPK27磷硝化作用HY5提高其转录催化活性，提高网站黄大环内酯基因遗传理解

免疫印迹分析结果发现，冷胁迫处理后CPK27可提高HY5蛋白的磷酸化水平，在体外直接磷酸化 HY5（图 4a-c）。通过磷硝化作用体现位点验测，发现HY5蛋白的S23和S57两个潜在磷酸化位点。为验证这些位点的功能，作者通过构建非磷酸化突变体，进行磷酸化水平验证，其中双突变体的磷酸化水平下降更为明显（图 4d）。这些结果表明，CPK27 介导的 HY5 磷酸化依赖于 S23 和 S57 这两个特定位点。

图4 CPK27磷碱化HY5并激发其平稳性

5、CPK27 在类黄酮生物学提炼通道中用于HY5的中上游

结合基因遗传体现和基础代谢物探讨报告（图5），CPK27在冷胁迫为了响应步骤中的功效于HY5的长江上游，利用政策调控 HY5 介导的类黄酮生物学制成径路干扰动植物耐冷性。

图5 CPK27帮助于HY5品牌进入校园市场

二、散文工作小结

上面归结，这篇文章实验取决于CPK27磷过酸体现HY5淀粉酶，激话类黄酮聚合行业，助于抗脱色类物质积淀，随之明显增强耐热作用。该实验体现了了“Ca²⁺-CPK27-HY5-类黄酮”级联调整制度化（图6），表明CPK27介导的HY5磷过酸是接触钙电磁波与次生细胞代谢防御力的关键点部门，为看法绿植的顺境反应网络上带来了新视觉。

图6 CPK27-HY5板块加快草本花卉接受冷胁迫的共识机制

三、拜谱个人总结

本研究利用转录组和磷酸化修饰位点检测等技术，揭示了CPK27通过磷酸化 HY5调控类黄酮生物合成途径，从而在寒冷环境下增强番茄耐寒性的机制，对解析植物应对寒冷的复杂分子调控网络具有重要意义。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的血清质组学、遮盖血清质组学、排泄组学、转录组学等两组学服务技术服务，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

基准论文资料：Lin R, Zhang W, Tian R, et al. CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato. New Phytol. 2025;246(5):2174-2191. doi:10.1111/nph.70134